DNA提取方法簡介

發(fā)布時(shí)間： 2021-10-22　　點(diǎn)擊次數(shù)： 3791次

一、DNA提取方法簡介

1、基因組DNA的提取

1.2、SDS法

SDS法原理

SDS是一種陰離子去垢劑，在高溫（55～65℃）條件下能裂解細(xì)胞，使染色體離析，蛋白變性，釋放出核酸；

提高鹽(KAc或NH4Ac)濃度并降低溫度（冰浴），使蛋白質(zhì)及多糖雜質(zhì)沉淀，離心后除去沉淀；

上清液中的DNA用酚/氯仿抽提，反復(fù)抽提后用乙醇沉淀水相中的DNA。

SDS法DNA提取緩沖液

改良的SDS法

水浴 60min, 其間緩慢搖動(dòng)幾次。加入150ul 的5mol/ LKac, 混勻, 冰浴15min 左右。

SDS法流程圖（以動(dòng)物組織為例）

1.3、其它

根據(jù)細(xì)胞裂解方式的不同有：

根據(jù)核酸分離純化方式的不同有：

吸附材料結(jié)合法	硅質(zhì)材料	高鹽低pH值結(jié)合核酸，低鹽高pH值洗脫。快捷高效。
	陰離子交換樹脂	低鹽高pH值結(jié)合核酸，高鹽低pH值洗脫。適用于純度要求高的實(shí)驗(yàn)。
	磁珠	磁性微粒掛上不同基團(tuán)可吸附不同的目的物，從而達(dá)到分離目的。
濃鹽法	利用RNP和DNP在鹽溶液中溶解度不同，將二者分離
有機(jī)溶劑抽提法	有機(jī)溶劑作為蛋白變性劑，同時(shí)抑制核酸酶的降解作用
密度梯度離心法	利用不同內(nèi)容物密度不同的原理分離各種內(nèi)容物

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