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          大鼠主動脈平滑肌細胞培養(yǎng)實驗——貼塊法

          發(fā)布時間: 2021-12-04  點擊次數(shù): 1108次

          材料與儀器

          SD大鼠
          PBS FBS DMEM
          手術(shù)剪 手術(shù)鉗 眼科剪刀 眼科鑷子 大頭針 手術(shù)刀 培養(yǎng)皿

          步驟

          一、實驗步驟

          1. SD 大鼠(150-200 g),斷頭,浸入75%的酒精中15 min。

          2. 置入超凈臺中,將大鼠固定于殺鼠板上,在無菌條件下打開腹腔,分離出胸主動脈、腹主動脈, 摘出。

          3. PBS 清洗3 遍,剝?nèi)ネ饽ぃ檬中g(shù)刀片刮去內(nèi)膜,留下中膜并將其移入1 mL 的培基中、剪成1x1 mm2 大小組織塊。

          4. 再將PBS清洗組織塊,移入25 mL 的培養(yǎng)瓶中,用尖嘴彎管均勻貼好組織塊,放入37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱倒置培養(yǎng)6 小時后,待組織塊貼壁后,再加入2.5 mL 培養(yǎng)液后放回培養(yǎng)箱中。

          5. 隨后每3 天予以全量換液。

          二、結(jié)果

          3-5 天后可見組織塊周圍有細胞爬出,大約2 周后80-90%融合。


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