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          提取純化產(chǎn)品冊---04 柱式總RNA提取提取產(chǎn)品(RC201、RC411、RC401)

          發(fā)布時間: 2025-01-16  點(diǎn)擊次數(shù): 174次

          MiPure®  Cell/Tissue miRNA Kit ( 離心柱型 )
          細(xì)胞/組織miRNA 提取試劑盒(RC201)

          miRNA提取效率高,起始量范圍廣 大分子RNA及基因組DNA殘留更少 操作簡便,兼容性強(qiáng)
          保存條件:Box 1:4°C避光保存;Box 2:室溫保存


          產(chǎn)品概述

          MiPure® Cell/Tissue miRNA Kit是基于硅膠柱吸附法開發(fā)的miRNA提取分離試劑盒,能有效提取長度20-200 nt的小片段RNA,包括miRNA、 siRNA等。高效的裂解液能輕松裂解各種動物組織和細(xì)胞,減少蛋白和雜質(zhì)對產(chǎn)物的干擾,優(yōu)化的硅膠吸附填料高效去除基因組DNA和大分子 RNA,保證產(chǎn)物的高產(chǎn)量和高質(zhì)量。試劑盒也可用于提取Total RNA,>200 nt 的大分子RNA。


          性能展示

          使用MiPure® Cell/Tissue miRNA Kit與Total RNA提取試劑(如Trizol)分別從等量樣本(細(xì)胞或小鼠肝臟組織) 中提取miRNA、Total RNA,瓊脂 糖凝膠電泳檢測等量產(chǎn)物,結(jié)果如圖所示:對于細(xì)胞或小鼠組織,MiPure®  Cell/Tissue miRNA Kit提取得到的產(chǎn)物中不含有大分子RNA,如 18S、28S RNA。

          提取純化產(chǎn)品冊---04 柱式總RNA提取提取產(chǎn)品(RC201、RC411、RC401)


          通過qPCR實(shí)驗檢測等量產(chǎn)物中miR-16基因,結(jié)果顯示,MiPure® Cell/Tissue miRNA Kit對于小片段RNA (包含miRNA)的提取產(chǎn)量優(yōu)于Trizol法。


          操作流程概要
          適用范圍

          10 - 100 mg 動物組織 / <5×106 培養(yǎng)細(xì)胞


          組分

          提取純化產(chǎn)品冊---04 柱式總RNA提取提取產(chǎn)品(RC201、RC411、RC401)

          提取純化產(chǎn)品冊---04 柱式總RNA提取提取產(chǎn)品(RC201、RC411、RC401)
          FastPure® Universal Plant Total RNA Isolation Kit
          通用型植物 RNA 提取試劑盒 (RC411)

          產(chǎn)品概述
          本試劑盒適用于從植物組織中快速提取總RNA。試劑盒包括兩套溶液體系,可以解決各種簡單的植物組織(小麥、水稻、玉米、擬南芥、煙草、油菜等)、富含多糖多酚的植物組織(棉花葉、大豆葉、松針、銀杏葉、無花果葉、梔子葉、小麥種子、玉米種子、紅豆種子、土豆、紅薯、大豆種子、芝麻種子、花生種子、油菜籽等)、水果果肉(西瓜、蘋果、桃、梨、香蕉、芒果等)、真菌(香菇、口蘑、平菇、粗糙脈孢菌等)的RNA提取。試劑盒采用硅膠柱純化技術(shù),提取過程中無需使用酚CHCL3、β-巰基乙醇等有毒試劑,也無需耗時的醇類沉淀,整個提取過程只需11 min。FastPure gDNA-Filter Columns III能有效地去除雜質(zhì)和gDNA,F(xiàn)astPure RNA Columns V能高效地結(jié)合RNA,搭配優(yōu)化后的Buffer,得到的總RNA純度高、gDNA殘留少、無蛋白和其他雜質(zhì)污染,可用于RT-PCR、熒光定量PCR、RNA建庫、芯片分析、Northern  Blot、Dot Blot和分子克隆等多種下游實(shí)驗。


          性能展示

          簡單快速
          提取純化產(chǎn)品冊---04 柱式總RNA提取提取產(chǎn)品(RC201、RC411、RC401)

          樣本適用范圍廣

          使用Vazyme #RC411 對不同植物樣本(包括普通植物、水果果肉、多糖多酚植物)和部分真菌樣本進(jìn)行 RNA 提取,并進(jìn)行1.2%瓊脂糖膠電泳。從圖中可以看出,Vazyme #RC411 提取試劑盒能兼容多種類型的植物樣本和部分真菌樣本,同時提取的RNA完整性好。
          提取純化產(chǎn)品冊---04 柱式總RNA提取提取產(chǎn)品(RC201、RC411、RC401)
          提取產(chǎn)量高

          使用Vazyme #RC411與A、B 公司相關(guān)產(chǎn)品提取提取擬南芥葉、玉米葉的總RNA,并計算提取產(chǎn)物得率。從圖中可以看出,Vazyme #RC411提取的RNA產(chǎn)量更高。
          提取純化產(chǎn)品冊---04 柱式總RNA提取提取產(chǎn)品(RC201、RC411、RC401)

          操作流程概要

          適用范圍

          葉片、多糖塊莖、塊根、種子、水果果肉、真菌

          組分                             RC411-01(50 rxns)                                                                                                                               

          Bufer PSL                                                                                                       (40ml)

          Bufer RWA                                                                                                      (40ml)

          Bufer RWB                                                                                                      (12ml)

          RNase-free ddH2O                                                                                         (10ml)

          FastPure gDNA-Filter Columns III (each in a 2 ml Collection Tube)          (50個)

          FastPure RNA Columns V (each in a 2 ml Collection Tube)                       (50個)

          RNase-free Collection Tubes 1.5 ml                                                              (50個)


          Bufer EL:提供普通植物組織裂解所需的環(huán)境;                            

          Bufer PSL:提供多糖多酚植物組織裂解所需的環(huán)境;

          Bufer RWA:去除蛋白質(zhì)、DNA 等雜質(zhì);

          Bufer RWB:去除鹽離子殘留;

          RNase-free ddH2O:洗脫總 RNA

          FastPure gDNA-Filter Columns III,吸附DNA,去除裂解雜志;
          FastPure RNA Columns V:特異性吸附 RNA
          Collection Tubes 2 ml:收集濾液
          RNase-free Collection Tubes 1.5 ml:收集 RNA


          自備材料

          無水乙醇、RNase-free槍頭、研缽等。


          樣本制備

          將新鮮或于 -85 ~ -65組織 ℃凍存的植物迅速轉(zhuǎn)移至液氮預(yù)冷的研缽中,研磨組織,其間不斷 加入液氮以保證組織處于低溫狀態(tài),直至研磨成粉末狀 ( 無明顯顆粒,如果研磨不夠充分, 會影響 RNA 提取效率和質(zhì)量 )。

          提取純化產(chǎn)品冊---04 柱式總RNA提取提取產(chǎn)品(RC201、RC411、RC401)

          FastPure® Plant Total RNA Isolation Kit (Polysaccharides/Polyphenolics-rich)FastPure® Plant Total RNA Isolation Kit (Polysaccharides/Polyphenolics-rich)FastPure plant Total RNA Isolation Kit(Polysaccharides/Polyphenolics-rich)
          多糖多酚植物總RNA提取試劑盒(RC401)

          純度高純度高 獲得的RNA純度高,可直接用于下游純度要求高的實(shí)驗
          通用性強(qiáng) 適用于富含多糖多酚植物組織與非多糖多酚植物組織中快速提取總RNA
          簡單快速 無需配備其他試劑、無需酚CHCL3抽提、常溫下操作即可
          基因組殘留少 配有基因組DNA吸附柱,可有效去除DNA污染

          保存條件:常溫(15~25°C)保存


          產(chǎn)品概述

          本試劑盒適用于植物組織,特別是富含多糖多酚植物組織(如棉花葉片、成熟水稻葉片、松針、楊樹、枇杷葉片、馬鈴薯塊莖、棉葉根、香

          本試劑盒適用于植物組織,特別是富含多糖多酚植物組織(如棉花葉片、成熟水稻葉片、松針、楊樹、枇杷葉片、馬鈴薯塊莖、棉葉根、香蕉、葡萄、蘋果、梨、月季、蕎麥種子、擬南芥種子、煙草等)中快速提取總RNA,同時可處理大量不同樣品。試劑盒采用硅膠柱純化技術(shù),提取過程中無需使用酚氯仿等有毒試劑,也無需耗時的醇類沉淀。Fastpure gDNA-FilterColumnⅡ能夠有效的分離上清和組織裂解物并吸附去除基因組,F(xiàn)astpure RNA Column Ⅳ能高效的結(jié)合RNA,配以優(yōu)化后的Bu?er溶液,使得到的總RNA純度高,無蛋白和其他雜質(zhì)污染,可用于RT-PCR、Real Time RT-PCR、芯片分析、Northern Blot、DotBlot、PolyA篩選、體外翻譯、RNase保護(hù)分析和分子克隆等多種下游實(shí)驗。


          性能展示

          產(chǎn)量高,完整度好

          使用Vazyme #RC401 分別提取50mg(香蕉果實(shí)、土豆塊莖、月季花瓣、松針、蘆葦葉片、鵝掌楸葉片、棉根、大豆葉片、水稻葉片),20 mg( 蕎麥種子 ) 的 RNA,并進(jìn)行 1% 瓊脂糖凝膠電泳。從圖中可以看出,Vazyme #RC401 樣本兼容性好,對于多糖多酚與非多糖裂液氮研磨:植物樣本在液氮中迅速研磨成粉末,取適量樣本進(jìn)行實(shí)驗。 裂解液選擇參照08-2/裂解液選擇方案。多酚的植物樣本,Vazyme #RC401 提取 RNA 完整度好,產(chǎn)量高。)

          提取純化產(chǎn)品冊---04 柱式總RNA提取提取產(chǎn)品(RC201、RC411、RC401)

          純度高


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          分別使用Vazyme #RC401與T公司相關(guān)產(chǎn)品提取松針、月季花、水稻葉片的RNA。通過Onedrop分Vazyme #RC401 與 T 公司提取的不同植物樣本的 RNA 進(jìn)行測定,可以看出 Vazyme #RC401 與T 公司提取 RNA 的 OD260/280 比值接近,均為 2.0 左右,但 T 公司OD260/230 比值明顯超出正常范圍,說明使用 Vazyme #RC401 提取的植物 RNA 純度明顯高于 T 公司相關(guān)產(chǎn)品。


          操作流程概要

          適用范圍:50-100mg 多糖多酚/非多糖多酚類樣本(注:若為種子樣本,建議上樣量不高于20mg)


          組分
          提取純化產(chǎn)品冊---04 柱式總RNA提取提取產(chǎn)品(RC201、RC411、RC401)提取純化產(chǎn)品冊---04 柱式總RNA提取提取產(chǎn)品(RC201、RC411、RC401)

          自備材料

          β- 巰基乙醇、無水乙醇、RNase-free 槍頭、研缽、水浴鍋或金屬浴等。

          Buffer PRW2 需在使用前添加一定量的無水乙醇



          樣本制備及提取流程

          A. 多糖多酚植物樣本提取流程

          樣本制備

          液氮研磨:50 - 100 mg植物樣本在液氮中迅速研磨成粉末,加入已于65℃預(yù)熱的500 μl Buffer PRL,立即劇烈渦旋震蕩30 - 60 sec。

          ①對于水分含量少的樣本如成熟的葉片、種子,淀粉含量高的塊莖等樣本投入量不高于 20 mg;水分含量多的樣本如草莓、西瓜果實(shí)等可適量增加樣本投入量。

          ②實(shí)驗前確保 Buffer PRL 中已加入 5% β- 巰基乙醇(如每 475 μl Buffer PRL 加 25 μl β - 巰基乙醇),顛倒混勻后 65 ℃ 預(yù)熱。裂解液建議現(xiàn)配現(xiàn)用。Buffer PRL 加入 β-巰基乙醇后可在 2 - 8℃保存一個月。

          ③液氮研磨后的樣本如不立即進(jìn)行下一步操作,可置于-70℃保存。

          ④使用前請檢查 Buffer PRL 中是否有晶體析出。若有晶體析出,可將 Buffer PRL 放置 65℃加熱使晶體溶解,混勻后方可使用。

          ⑤樣本處理:樣品處理量不要超過基因組去除柱和 RNA 吸附柱的吸附能力,否則造成 DNA 殘留或產(chǎn)量降低。開始摸索實(shí)驗條件時,樣本適宜的起始投入量 ≤50 mg,將來根據(jù)樣品試驗情況增加或者減少處理量。

          提取純化產(chǎn)品冊---04 柱式總RNA提取提取產(chǎn)品(RC201、RC411、RC401)

          B. 非多糖多酚植物樣本提取流程

          樣本制備

          液氮研磨:

          50 - 100 mg植物樣本在液氮中迅速研磨成粉末,加入已于65℃預(yù)熱的500 μl Buffer PRL Plus,立即劇烈渦旋震蕩30 - 60 sec。

          ①對于水分含量少的樣本如成熟的葉片、種子,淀粉含量高的塊莖等樣本投入量不高于 20 mg;水分含量多的樣本如草莓、西瓜果實(shí)等可適量增加樣本投入量。

          ②實(shí)驗前確保Buffer PRL Plus中已加入5% β-巰基乙醇(如每475 μl Buffer PRL Plus加25 μl β-巰基乙醇),顛倒混勻后65 ℃ 預(yù)熱。裂解液建議現(xiàn)配現(xiàn)用。Buffer PRL Plus加入β-巰基乙醇后可在 2 - 8℃保存一個月。

          ③液氮研磨后的樣本如不立即進(jìn)行下一步操作,可置于-70°C保存。

          ④樣本處理:樣品處理量不要超過基因組去除柱和 RNA 吸附柱的吸附能力,否則造成 DNA 殘留或產(chǎn)量降低。開始摸索實(shí)驗條件時,樣本適宜的起始投入量 ≤50 mg,將來根據(jù)樣品試驗情況增加或者減少處理量。

          提取流程
          提取純化產(chǎn)品冊---04 柱式總RNA提取提取產(chǎn)品(RC201、RC411、RC401)

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